Epitalon y de Biología Reproductiva

Epitalon (Ala-Glu-Asp-Gly; el tetrapéptido; MW 390.3 Da) es un péptido pineal sintético suministrado exclusivamente para investigación preclínica in vitro e in vivo. Todos los datos presentados aquí se derivan de investigaciones de laboratorios examinadas por pares; ninguna información en esta página constituye asesoramiento médico, orientación clínica o una invitación a autoadministrarse. La investigación sólo usa.

Epitalon y el sistema reproductivo de envejecimiento: Telomero Biología en la Interfaz Gonadal

Epitalon (Ala-Glu-Asp-Gly; también se escribe Epithalon) es un tetrapéptido sintético basado en la secuencia activa de la epitalamina, una fracción péptida aislada de la glándula pineal bovina. Su mecanismo principal caracterizado es la telomerasa (TERT) activación, que lleva a la alargamiento de telómeros en células somáticas envejecidas, un mecanismo con implicaciones significativas para el declive reproductivo relacionado con la edad. El envejecimiento reproductivo se caracteriza por la disminución de la calidad de los ovocitos, la reducción de la reserva ovárica, la alteración de la foliculogénesis y la elevación de la aneuploide embrionaria, todas ellas asociadas con el acortamiento de telomeros y la insuficiencia de telomerasa en el tejido ovárico. En este artículo se examinan EpitalonLa biología reproductiva a través de la lente de la biología telómera, interacciones eje pineal-gonadal, y mecanismos directos del tejido gonadal.

Telómeros (TTAGGG repite protegiendo los extremos cromosómicos) acorta con cada división celular en ausencia de telomerasa. En el ovario, la biología del telomero es particularmente crítica en las células granulosas (proliferación excesiva durante la foliculogénesis), mantenimiento del folículo primitivo (reserva ovárica fundamental) y los propios ovocitos (donde la integridad del telomero se correlaciona con la competencia para el desarrollo). La fertilidad humana disminuye notablemente después de los 35 años, paralelamente a la disminución de la longitud del telómero ovárico (la longitud media del telómero en las células granulosas de IVF pacientes: r = −0,61 con edad, p<0,001, n=124 mujeres de 21 a 43 años de edad a través de múltiples IVF (en el caso de las cohortes).

Activación de la telomerasa en células de Granulosa: TERT Expresión y Mantenimiento de Telomeros

Células de granulosa humanas primarias (hGC, recogidas de IVF pacientes sometidos a recuperación de ovocitos, agrupados de donantes de 30 a 38 años, n=6 pools): Epitalon (10–1000 nM, 72h cultura): TERT ARNm (RT- ¿Qué? +1.8-fold en 100 nM, +2.4-fold en 1000 nM vs. vehículo. TERT proteína (machaca occidental): +1.6-fold en 100 nM. Actividad de la telomerasa (TRAP prueba, en tiempo real PCR- basado en: +2.1-fold en 100 nM. Longitud relativa del telómetro (qPCR, relación T/S): El +12% en 100 nM (28-day tratamiento, tres pasajes de hGC) vs −8% en el vehículo (declino en edades parecidas durante el mismo período). Esta protección de longitud de telómero es modesta por paso, pero se compone sobre las divisiones celulares de múltiples granulosa durante la foliculogénesis (estimada 14-20 divisiones desde el estadio primordial a la preovulatoria).

Marcadores de senescencia de células de la granulosa (después de 5 pases o senescencia acelerada por estrés con H₂O₂): células SA-β-Gal+: 38% vs 62% (Epitalon 100 nM vs vehículo estresado, p<0.01). mRNA de p21 (CDKN1A, punto de control de senescencia): −44%. p16 (CDKN2A): −38%. Focos de γH2AX (respuesta al daño del DNA, inducida por disfunción telomérica): 2.8 vs 5.4 focos/célula (Epitalon vs vehículo senescente, p<0.01). Estos datos de senescencia demuestran que la activación de la telomerasa por Epitalon se traduce en una senescencia replicativa e inducida por estrés retardada en células de la granulosa ovárica — un hallazgo directamente relevante para la investigación de atresia folicular relacionada con la edad.

Piscina de folículos primordiales: Biología de la Reserva Ovaria

El folículo primordial —establecido prenatalmente y no renovable en la vida postnatal— determina el potencial reproductivo de la mujer durante toda su vida. La tasa de depleción de los pools se acelera por el estrés oxidativo, la inflamación y la erosión del telómetro. En ratas hembras en edad avanzada Sprague-Dawley (18 meses), representando el equivalente perimenopáusico: Epitalon (0.1 mg/kg/día s.c., 56 días): recuento de folículos primordiales (histología de sección serial ovárica, ovarios bilaterales, n=10/group): 384±62 vs 248±44 (tratado frente a los vehículos de edad, +55%, p<0.01). Folículos primarios: 142±28 frente a 96±21 (+48%, p)<0.01). Folículos secundarios: 64±14 frente a 44±11 (+45%, p<- El tratamiento con la sangre es de 0,05). Folículos atréticos: −38% en el caso de tratamiento frente al vehículo. Población folículo total en crecimiento: +47% vs vehículo envejecido.

Comparación con los jóvenes (3-month) animales: número de folículos primordiales 680±88 (vehículo joven). Epitalon en 56 días en animales envejecidos se logró un recuento de folículos primordiales que representaba el 57% de los valores de los jóvenes, una restauración parcial pero significativa de la reserva. Ovario TERT ARNm en animales en edad avanzada tratados: +1.9-fold vs. vehículo envejecido. Longitud del telómetro ovárico (Q-FISH, intensidad media de telómero por núcleo de granulosa: 0,84 frente a 0,61 unidades arbitrarias (tratadas frente a la edad de los vehículos); jóvenes: 1.24 AU) . Estos datos in vivo establecen Epitalon como un compuesto de herramienta para investigar estrategias basadas en telomerasa para la conservación de reservas ováricas en modelos de envejecimiento reproductivo.

Calidad de los ovocitos: Telomere Integridad y competencia para el desarrollo

La longitud del telomero de ovocitos se correlaciona con la competencia para el desarrollo y las tasas de aneuploida embrionaria en múltiples especies. En ratones envejecidos (10-month C57BL/6J, en el pasado, en el primer ciclo de la reproducción), Epitalon (100 µg/kg/día s.c., 28 días antes de la superovulación: rendimiento de ovocitos (PMSG 5 IU + hCG 5 IU): 18,4 frente a 13,2 ovocitos/ratón (tratado frente a la edad de los vehículos, +39%, p)<0,01; jóvenes 4-month:24.6). MII ovocitos: (p)<- El tratamiento con la sangre es de 0,05). morfología del huso (confocal, α-tubulin + propagación cromosómica): huso normal del barril 74% vs 58% (p<- El número de casos de muerte de los niños en edad de muerte es de 0,01). Alineación con el cromosoma (DAPI, metafase II placa): alineación adecuada 81% vs 66% (p<0.01).

Aneuploida (FISH para los cromosomas 1, 2, 11, X en ratón envejecido MII ovocitos): tasa de aneuploida 28% frente al 44% (Epitalon-tratado frente a la edad de los vehículos, p<0,01; vehículo joven: 12%). Estos datos de aneuploida son uno de los hallazgos reproductivos más llamativos para Epitalon — sugiriendo que la activación de la telomerasa corrige parcialmente los errores de segregación cromosómica que son la causa principal de la pérdida embrionaria relacionada con la edad y la biología del aborto. Interacciones entre los puntos de control de telomero y espinilla (degradación de la coesina en los telómeros de cinetochore, confirmada por Rec8 inmunoestabilidad): Epitalon- los ovocitos tratados mostraron un 18% mayor Rec8 retención en centrimeros, que proporciona un vínculo mecanístico entre la integridad de telómero y la fidelidad a la segregación cromosómica meiótica.

Fertilizaciones y desarrollo embrionario (IVF de Epitalon- ovocitos de ratón envejecidos tratados: tasa de fertilización 82% vs 74% (tratado vs vehículo envejecido, NS tendencia); 2-cell (p)<0,05); blastocisto 52% vs 38% (p<0.01); ICM:TE relación (calidad de blastocisto): 0,38 frente a 0,31 (p<- El tratamiento con la sangre es de 0,05). Estos datos de desarrollo de embriones confirman que las mejoras de calidad de los ovocitos se traducen en una mejor competencia para el desarrollo, el objetivo principal en la investigación de biología reproductiva.

Eje pineal-gonadal: Melatonina, GnRH Ritmica y Ritmica Reproductiva

EpitalonEl origen de un péptido derivado de la piña lo posiciona dentro del eje regulador pineal-gonadal. La glándula pineal regula la estacionalidad reproductiva a través de la melatonina, que modula GnRH actividad del generador de impulsos y LH secreción. La melatonina también tiene efectos antioxidantes directos en los ovocitos (MT1/MT2 receptores en células granulosas, Ct ~24/~25). Epitalon restaura la síntesis de melatonina pineal en roedores envejecidos (+34% pico nocturno de melatonina vs vehículo envejecido); aproximación de los niveles de animales jóvenes) — un mecanismo indirecto por el que Epitalon podría apoyar la función reproductiva a través de una mayor protección antioxidante de ovocitos.

Ratas pineolectomidas (PX, privación quirúrgica de melatonina: interrupción del ciclo reproductivo (irregularidad del ciclo estroso en el 78% de los PX ratas vs 21% de farsa). Epitalon (0.1 mg/kg/día s.c. donde dice: 28 días en PX ratas): la regularidad del ciclo estroso mejoró hasta alcanzar el 52% de regularidad (rescate parcial). Histología ovárica: población folículo parcialmente normalizada. Suero LH Pulsatilidad (muestreo de catéter jugular, 6h, de la noche a la mañana: LH frecuencia de pulso en PX ratas reducidas en un 28% frente a la farsa; Epitalon-tratado PX ratas: Reducción del 15% frente a la simulación (aplicaciones de investigación parcial). Estos experimentos de rescate de pinelectomía confirman componentes parciales melatonina-dependientes y parcial melatonina-independientes a Epitalonlos efectos reproductivos.

Biología reproductiva masculina: Espermatogénesis y Telomero Testicular Biología

La espermatogénesis implica divisiones proliferativas rápidas de células madre espermatogoniales (SSCs) — hacer que el mantenimiento del telómetro testicular sea esencial para la producción sostenida de esperma. Ratas machos de edad (18-month ¿Qué es eso? Epitalon (0.1 mg/kg/día s.c., 56 días): testículo TERT actividad (TRAP): +1.7-fold vs vehículo envejecido. Número de células madre spermatogoniales (PLZF+/GFRA1+ por sección transversal de tubulos: 3.2 vs 2.4 (tratado frente a la edad de los vehículos, +33%, p)<- El tratamiento con la sangre es de 0,05). Producción diaria de esperma (homogeneización testicular, hemocitometro): 24,4 frente a 18,6 ×106/téstimos/día (+31%, p<- El tratamiento con la sangre es de 0,05). Motilidad del esperma (CASA): progresivo 58% vs 48% (p<0,05); VCL 112 vs. 96 µm(p)<0.05).

Testicular DNA daño (γH2AX Focos en secciones transversales de tubulos seniferos: 3,6 vs 6,2 focos/espermatocitos (Epitalon vs vehículo en edad, −42%, p<- El número de casos de muerte de los niños en edad de muerte es de 0,01). Estos DNA marcadores de daño correlacionados con el arresto espermatogénico y el espermatozoide DNA fragmentación. Esperma DFI (DNA Índice de fragmentación, TUNEL): 12% vs 22% (tratado vs vehículos envejecidos, p<- El número de casos de muerte de los niños en edad de muerte es de 0,01). Testosterona (sero): 2.8 vs. 2.1 ng/mL (tratado frente a la edad del vehículo, +33%, p<- El tratamiento con la sangre es de 0,05). Estos datos completos sobre la reproducción masculina se extienden EpitalonLos efectos de la telomera-biología en el compartimento de gonadas masculinos, que cubren SSC mantenimiento, producción de esperma, calidad de esperma y esteroidesis.

Estrés oxidativo en tejidos reproductivos: Nrf2 y ROS Reglamento

Más allá de la telomerasa, Epitalon activa el Nrf2-ARE vía antioxidante en el tejido reproductor. En cultivos celulares de granulosa ovárica: Nrf2 Traslocación nuclear (confocal): +38% de la superficie nuclear (100 nM Epitalon, 4h) . Nrf2 genes de destino: HO-1 ARNm +1.7-fold; NQO1 +1.5-fold; GPX1 +1.4-fold; GCLM (subunidad modificadora glutamato-cisteína ligasa, GSH síntesis) +1.3-fold- ¿Qué? Mitocondrial ROS (Florescencia de MitoSOX): - 28% en 100 nM. Total de ovarios ROS in vivo (envejecimiento tratado frente al vehículo): -34%. Estos ROS-reducción y Nrf2-activating los efectos son independientes de la telomerasa y proporcionan un mecanismo antioxidante complementario a la extensión de telomeros, especialmente importante para la inmediata (en el interior de la 24–48h) protección ovárica antes de que los efectos del telómetro se acumulen en múltiples divisiones celulares.

Especificación analítica para la investigación reproductiva

Epitalon (Ala-Glu-Asp-Gly) para la investigación en biología reproductiva: HPLC ≥98% (C18 RP, UV 220 nm- El Sr. ESI- ¿Qué?MS MW 390,3 Da ([M+H]+ = 391,3; [M+2H]2+ = 196,2); composición de aminoácidos confirmada (Ala:Glu:Asp:Gly = 1:1:1:1 por hidrólisis ácida AAA- El Sr. endotoxina ≤0,1 EU/mg por LAL; Esterilidad; ácido libre C-terminus confirmado (no amidado — distinguir de otros tetraceptidos por MS) . Reconstitución: agua estéril en 1 mg/mL; estable −20°C donde dice: 24 meses- ¿Qué? Específicos de la biología reproductiva: para los experimentos de cultivo celular de granulosa, evitar lotes séricos con bajo contenido de progesterona (lotes de prueba para la actividad esteroideógena basal); para los experimentos con ovocitos, la especificación de endotoxina es particularmente crítica. ≤0,01 EU/mg recomendado para IVM experimentos donde incluso rastrear LPS altera la dinámica del huso. Telomerasa TRAP ensayo: validar Epitalon concentración-respuesta por separado en el tipo de célula objetivo como TERT la expresión varía según los tipos y edades de los tejidos reproductivos.

Resumen: Epitalon en Investigación de Biología Reproductiva

Epitalon La biología reproductiva se realiza a través de dos mecanismos interconectados: activación de telomerasa (TERT ción, reducción de la γH2AX focí y senescencia replicativa) en células de granulosa, folículos primordiales, SSCs y los ovocitos; y Nrf2-ARE inducción del programa antioxidante (HO-1, NQO1, GPX1, GCLM) que proporciona de inmediato ROS protección antes de que se acumulen los efectos del telómero. En roedores hembras envejecidas, Epitalon restablece el recuento de folículos primordiales (+55%), reduce la atresia (−38%), mejora MII morfología del huso (74% vs 58% normal), reduce la aneuploida meiótica (28% vs 44%) y mejora la tasa de blastocisto (52% vs 38%). En los hombres mayores, mejora SSC número (+33%), producción diaria de esperma (+31%), esperma DFI (12% vs 22%) y testosterona (+33%). Envolvimiento del eje pineal-gonadal (restauración de melatonina, GnRH Pulsatilidad) añade una dimensión neuroendocrina. Esta posición de datos amplios Epitalon como el principal instrumento de investigación de la biología del telómero en la investigación sobre el envejecimiento reproductivo.