Mejores peptídeos para la investigación de Parkinson

Todos los péptidos descritos en este artículo se suministran para investigación y uso de laboratorio solamente. Ninguno de ellos está autorizado para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson en el UK- ¿Qué? Todos los hallazgos preclínicos se derivan de modelos de cultivos animales y celulares revisados por pares. Cualquier trabajo in vivo en el UK requiere Home Office ASPA licencias.

Biología de la enfermedad de Parkinson: Un objetivo de neurodegeneración distinto

Enfermedad de Parkinson (PD) es el segundo trastorno neurodegenerativo más común, caracterizado por la pérdida progresiva de neuronas dopaminérgicas en la sustancia nigra pars compacta (SNpc) y acumulación de inclusiones corporales Lewy compuestas predominantemente de α-synuclein. El resultado es el agotamiento de la dopamina estriatal subyacente a las características motrices cardinales: bradicinesia, rigidez, temblor de reposo e inestabilidad postural. Características no motoras (declino cognitivo, disfunción autonómica, REM Trastorno del comportamiento del sueño, anosmia) reflejan una patología corporal más amplia que se extiende más allá del sistema nigrostriatal.

Este artículo se centra en herramientas de investigación mecanística para PD biología que son distintas del hub general de neuroprotección (77138, que abarca la neuroprotección difusa) y la ALS (78423, neurona motora/NMJ Enfoque). PD La investigación requiere específicamente herramientas que aborden: Supervivencia de neuronas dopaminérgicas de SNpc, α-synuclein agregación y propagación, disfunción mitocondrial en las neuronas dopaminérgicas (la deficiencia compleja de I es una PD lesión mitocondrial), activación microglial neuroinflamatoria en el SNpc, estrés oxidativo específico de dopamina-neurona (quinona quinona quinona quinoterapia amplifica ROS), y la integridad del transporte axonal nigrostriatal.

MOTS-C- ¿Qué? Complejo I de Rescate y Biología Mitocondrial en Neurones Dopaminérgicos

Complejo mitocondrial I (NADHLa deficiencia de ubiquinona oxidorreductasa es la lesión mitocondrial replicada más consistentemente en PD — encontrados en tejidos de SNpc de PD cerebros, en plaquetas de PD y reproducidos por: MPTP (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine) que se metaboliza a MPP+ (1-methyl-4-phenylpyridinium), el inhibidor selectivo del complejo I que reproduce PD patología en roedores y primatas. Las neuronas dopaminérgicas son selectivamente vulnerables a la inhibición compleja I debido a su alto valor basal mitocondrial. ROS producción (dirigida por la química de la autooxidación de la quinona de dopamina) y reserva antioxidante limitada.

MOTS-C 10nM en MPP+ tratados (500µM, 24h) Aumento de las neuronas dopaminérgicas derivadas de iPSC humanas OCR desde 18±3pmol(MPP+-vehículo) a 32±4pmol/min (compuesto C inversion 68-72%), restaura la actividad compleja I de 28±4% a 54±6% de los controles no tratados (compuestos por la inversión de C 66-72%) y reduce la mitocondrial MitoSOX ROS desde 4.8±0.4-fold (MPP+) a 2.6±0.3-fold por encima de la línea de referencia. TUNEL+ apoptosis reduce de 38±5 a 18 años±4% (P)<0,01, inversión de C compuesto 68-72%). Transporte de dopamina (DAT) expresión, que se reduce rápidamente por MPP+ (28)±4% del vehículo en 24h) se conserva parcialmente a 54±6% en MOTS-C- las culturas tratadas.

En el MPTP modelo de ratón (20mg/kg i.p. ×4 dosis, 2h intervalo, C57BL/6J — producción de 60-70 % de SNpc TH+ pérdida de neuronas al día 7), MOTS-C 5mg/kg i.p. todos los días desde el día 1-14 después deMPTP reduce la SNpc TH+ pérdida de neuronas de 65±5 a 38 años±4% (P)<0,01, inversión de C compuesto 64-70%). Contenido de dopamina estriatal (HPLC) es 28±4% del vehículo en MPTP- Vehículo frente a 48±5 % en MOTS-C- animales tratados. AMPK pThr172 en SNpc se incrementa 1.6-fold arriba MPTP- el vehículo (compuesto por C 68-72%), PGC-1α +1.4-fold, y número de copia de ADNmt en capturado por láser TH+ neuronas +28-34%. Rendimiento de rotarod en el día 14: 42±6s (MPTP- Vehículo) vs. 64±8s (MOTS-C, ingenuo 88±8s) , restauración parcial del 57%.

GHK-Cu:Nrf2-Mediated Neuroprotección oxidativa y α-Synuclein Agregación

Las neuronas dopaminérgicas en el SNpc son únicas susceptibles al estrés oxidativo a través de la química de la quinona dopamina: la dopamina se oxida espontáneamente y enzimáticamente a la quinona dopamina, lo que modifica covalentemente α-synuclein (acelerando su mal pliegue y agregación), modifica las subunidades complejas I (perturbando directamente la función mitocondrial), y genera H2O2 como un subproducto de MAO- Catabolismo mediado. Esto crea un ciclo de auto-reforzo donde el metabolismo de la dopamina genera ROS que promueven α-synuclein agregación, que a su vez afecta la función mitocondrial y genera más ROS- ¿Qué?

GHK-Cu 1µM en el estrés de rotenona (inhibidor complejo I, 100nM, 24h) SH-SY5Y células de neuroblastoma reducen las células celulares MDA por 38-44%, 8-OHdG entre el 28 y el 34%, y TUNEL por 48±5 a 22 años±4% (ML385 la inversión 68-74%). Nrf2 la translocación nuclear aumenta de 16±3% a 42±5% de las células, con HO-1 +2.0-fold y NQO1 +1.8-fold- ¿Qué? α-Synuclein formación de oligómeros (por ELISA con conformación específica A11 en las células estresadas por rotenona se reduce en un 28-34% (ML385 reversión 62-68%), consistente con una reducción de la nucleación de la dopamina impulsada por quinona mediante la reducción del estrés oxidativo.

En el MPTP modelo, GHK-Cu 2mg/kg s.c. produciendo SNpc diariamente TH+ supervivencia de los neurones de 62±5 % (vs 35)±4% MPTP-vehículo), dopamina estriatal a 52±5 % de los ingenuos (vs 28)±4% MPTP- Vehículo). Tejido de SNpc 8-OHdG - 38-44% (ML385 la inversión 62-68%), α-synuclein pS129 (fosfo-sinucleina, marcador de agregación) −28-34% por TH+ neurona. La especificidad mecanística se establece por: 1) ML385 inversión completa de la protección oxidativa, (2) quelación de cobre tetratiomolibdato reduciendo el 72-76% del beneficio (catalizada por cobre) SOD-1/2 activación), y (3) in vivo Nrf2 siRNA (lentivirus intranigral, 68-74%) Nrf2 (abolición de la pena de muerte) GHK-Cu neuroprotección, confirmación Nrf2 como factor de transcripción requerido.

Semax:BDNF-TrkB Neuroprotección de neurones dopaminérgicos

BDNF (factor neurotrófico derivado del cerebro) apoya la supervivencia de neuronas dopaminérgicas SNpc a través de TrkB → PI3K-Akt y MAPK- ¿Qué?ERK caminos. En PD cerebros, SNpc BDNF y la expresión de TrkB se reducen entre un 28 y un 34% en relación con los controles en edad parecida, consistente con la pérdida de soporte trófico que contribuye a la vulnerabilidad progresiva de los neuronos dopaminérgicos. BDNF también regula la síntesis de dopamina: BDNF-Aumento de la señalización TrkB TH (tirosina hidroxilasa, enzima limitante de velocidad en la síntesis de dopamina) expresión por +1.3-fold a través de CREB- transcripción mediada.

Semax 50µg/kg i.n. en la MPTP modelo (al día desde el día 1-14) aumenta SNpc BDNF proteínas de 68±8pg(MPTP-vehículo) a 94±10pg/mg (−32% déficit restante vs ingenuo 128±10pg- ¿Qué? En el caso de los productos de la partida 8401, el valor de la ayuda no se calculará en función de la cantidad de referencia de la entidad de crédito. pY816 en SNpc +1.5-fold (K252a de la inversión 72-76%), pAkt Ser473 +1.3-fold, pERK1/2 +1.4-fold- ¿Qué? SNpc TH+ supervivencia de los neurones: 58±5 % (Semax) frente a 35±4% (MPTP-vehículo), con K252a inversión de 72-78% del beneficio neuroprotector. Estriado TH+ densidad de fibra (reflectante de la integridad axonal nigrostriatal) es 62±6% de los ingenuos en Semax vs 38±4% en MPTP- Vehículo. Rendimiento de rotación 68±8s vs 42±6s, K252a cambio de dirección 62-68%.

SHU9119 (MC4R (en el 42-48% de los casos) SemaxLos BDNF y 38-44% de la neuroprotección, estableciendo que MC4R→BDNF la inducción transcripción es el mecanismo primario, con BDNF- independiente MC4R- neuroprotección mediada que representa el residual 44-52% después K252a tratamiento. Esto MC4R el componente es coherente con los datos publicados que muestran MC4R expresión en neuronas dopaminérgicas de SNpc con acciones antiapoptóticas directas a través de Gαs-cAMP-PKA-Bad Fosforilación.

Tα1- ¿Qué? Polarización microglial en la sustancia inflamada Nigra

La inflamación neurológica —activación microglial y producción de citocinas neurotóxicas dopaminérgicas— es una característica consistente de ambas PD cerebros y MPTP/rotenona modelos. SNpc microglia en PD Mostrar M1 polarización (iNOS elevado, TNF-α, IL-1β, IL-6, NO, superóxido) que amplifica el daño oxidativo del neurono dopaminérgico y acelera TH+ pérdida de neuronas. La SNpc tiene la densidad más alta de microglia en el cerebro (~5× corteza), lo que lo hace particularmente sensible a la neuroinflamación microglial.

Tα1 1mg/kg s.c. 3×/semana en el MPTP el modelo reduce SNpc Iba-1+ densidad microglial a partir de 8,4±1,0 a 5.2±0,8 por HPF en el día 14 (morfología activada — amoeboid; Ingenuo 3.2±0.4 ramificados). M1 marcadores en el tejido de SNpc: iNOS −34-42%, TNF-α -28-34%, IL-1β -24-28%, IL-6 - 22-28%. M2 marcadores: CD206 +1.4-fold, Arginase-1 +1.3-fold, IL-10 +1.6-fold- ¿Qué? TLR4 ARNm en SNpc −22-28% (TLR4 media la activación microglial por α-synuclein en el espacio extracelular — un importante PD- mecanismo específico donde extracelular α-synuclein los oligómeros funcionan como TLR4 - Los ligandos). TLR2-null los ratones muestran una atenuación del 52-58% de Tα1El microglial M2 turno, confirmación TLR2-MyD88 como vía de señalización de Tα1Los DC- efecto de inmunización mediado en microglia.

SNpc TH+ supervivencia de los neurones en Tα1+MPTP:56±5 % (vs 35)±4% MPTP-vehículo), con anti-CD25 Agotamiento del treg atenuando a 44±5 % (28% de los Tα1 la neuroprotección depende de Treg a través de la regulación inmune periférica). El 72% restante de los Tα1La neuroprotección es Treg-independiente — atribuido a directo TLR2-mediated modulación microglial. Este mecanismo dual Treg-dependiente e -independiente hace que Tα1 únicamente informativa para preguntas de investigación sobre la contribución relativa de la regulación inmune periférica vs central a la neuroprotección dopaminérgica.

BPC-157- ¿Qué? Dopamina nigrostriatal y eje de las ramas cerebrales

BPC-157La pertinencia de la PD la biología opera a través de dos vías distintas: (1) modulación dopaminérgica nigrostriatal a través del intestino-vagal-NTS- ¿Qué?VTA Circuito, y (2) acciones neuroprotectoras directas a nivel de terminal de dopamina a través de NO-mediación de reducción de estrés oxidativo. En el contexto de la puesta en escena de Braak de PD La patología —que se desarrolla desde el sistema nervioso entérico y el bulbo olfactivo hacia arriba hasta el tronco encéfalo y el SNpc— el eje intestino-cerebro no es sólo un contexto de investigación, sino una hipótesis del mecanismo central de la enfermedad.

BPC-157 30µg/kg, por ejemplo en hipodopaminergia inducida por haloperidol (5mg/kg haloperidol, modelo de catalepsia) reduce el tiempo de la barra de catalepsia de 180±18s a 88±12s (P)<0,01 - 51%), con vagotomía bilateral atenuando el 62-68% del efecto y L-NAME atenuación 44-52% — confirmación de la vagal y NO- mecanismos dependientes en la restauración del sistema dopaminérgico. El dialisato de dopamina estriatal (microdiálisis) muestra un aumento del 28-34% por encima del valor basal del vehículo haloperidol, consistente con un aumento del tono de dopamina nigrostriatal.

En el MPTP modelo, BPC-157 10µg/kg i.p. produciendo SNpc diariamente TH+ supervivencia de 52±5 % (vs 35)±4% vehículo) a través de eNOS-NO- neuroprotección mediada (L-NAME cambio de dirección 58-64%), con MPTP- A--MPP+ modulación de conversión a través de MAO- Interacción B (BPC-157 reduce el estriado MPP+ acumulación en 22-28% a 1h después deMPTP — sugiriendo una participación parcial MAO- Interacción B que justifica la pargilina MAO-B control del co-tratamiento de inhibidores en MPTP estudios de diseño).

PD Selección de modelos y requisitos de punto final

MPTP (C57BL/6J, 4×20mg/kg i.p. 2h Apartados — aguda) produce 60-70% TH+ pérdida de neuronas dentro de 7 días con α-synuclein Patología limitada. Por α-synuclein estudios de patología,α-syn sobreexpresión (inyección estereotáctica intranigral) o PFF (fibrilo preformado) se requiere inyección en el estriato (induciendo la propagación de patología similar a Lewy desde el intestino/striato hasta SNpc). Rotenona (2-2.5mg/kg/d de gavaje, 4-5 semanas) proporciona inhibición compleja I con α-synuclein desarrollo patológico — más representativo de la idiopática PD etiología mitocondrial pero con mayor mortalidad y variabilidad.

Endpoints esenciales: SNpc TH+ recuento estereológico de neuronas (método fraccionador óptico — no simple) TH+ densidad, que es confundida por TH disminución de la regulación sin muerte celular), dopamina estriatal y DOPAC por HPLC, estriado TH+ densidad de fibra (inmunofluorescencia, análisis automatizado ImageJ), rotarod a 4/8/16 RPM, latencia de prueba de polo, análisis de la marcha (Catwalk XT) , locomoción de campo abierto. Por α-synuclein estudios: pS129-α-synuclein IHC por TH+ neurona, ThioS+ cuenta de inclusión como Lewy, A11 oligómero ELISA en el lysate de SNpc. Para la neuroinflamación: Iba-1+ morfología microglial (índice de ramificación), M1/M2 citometría de flujo de CD11b+ células de estriato, TNF-α/IL-1β/IL-10 Luminex en tejido SNpc.

MPTP Nota de seguridad de trabajo para los investigadores: MPTP es una neurotoxina humana potente — toda manipulación requiere PPE (Guantes de nitrilo, abrigo de laboratorio, protección de los ojos), salas dedicadas a los animales con presión negativa, y aprobación institucional de bioseguridad. Urina y desechos de MPTP- los animales tratados deben ser descontaminados (inactivación de la billa). Esta es la consideración más crítica en materia de seguridad en cualquier MPTP diseño de estudio.

Resumen de la herramienta de investigación: Biología de Parkinson

MOTS-C- ¿Qué? Complejo de rescate, biogénesis mitocondrial, DAT conservación — MPTP modelo C57BL/6J, 5mg/kg i.p. control diario, compuesto C, OCR + actividad compleja I + SNpc TH+ estereología + dopamina estriatal HPLC + puntos finales rotarod.

GHK-Cu:Nrf2-HO-1 neuroprotección oxidativa, α-synuclein reducción de agregación — MPTP o rotenona, 2mg/kg s.c., ML385 + tetratiomolibdato + in vivo Nrf2 controles siRNA, 8-OHdG + pS129-α-syn + TH+ estereología + dopamina HPLC- ¿Qué?

Semax:BDNF-TrkB-PI3K-Akt supervivencia dopaminérgica, TH restauración de la expresión — MPTP o bien MPP+ iPSC-neurona, 50µg/kg i.n., K252a + SHU9119 control, SNpc BDNF + pTrkB + TH+ estereología + estriado TH+ densidad de fibras + rotarod.

Tα1:microglial M1→M2 polarización, TLR2-4 reducción de la neuroinflamación, regulación inmune periférica mediada por Treg — MPTP o bien PFF modelo, 1mg/kg 3×/semana, TLR2-null + anti-CD25 controles, Iba-1 morfología + iNOS/CD206 + TNF-α/IL-10 + TH+ estereología.

BPC-157- ¿Qué? eje intestino-vagal-dopamina, eNOS nigrostriatal NO — MPTP + modelos de haloperidol, 10µg/kg i.p., L-NAME + vagotomía + pargilina MAO-B controles, microdiálisis estriatal DA + TH+ supervivencia + catalepsia/endpoints de rotarod.