Sermorelin e de Biologia Reprodutiva

Sermorelin (GHRH 1-29 NH2) é um sintético 29-amino análogo ácido de endógeno growth hormone-releasing hormone Fornecido exclusivamente para pesquisa pré- clínica in vitro e in vivo. Todos os dados aqui apresentados derivam de investigações laboratoriais examinadas por pares; nenhuma informação nesta página constitui aconselhamento médico, orientação clínica ou convite para autoadministração. A pesquisa só usa.

Sermorelin- Não. Pontos de entrada da Biologia Estrutural e do Sistema Reprodutivo

Sermorelin é o N-terminal biologicamente ativo 29-amino fragmento ácido de humanos growth hormone-releasing hormone (GHRH 1-44), com a alteração da amida C-terminal (NH2) necessário para a afinidade de ligação total ao receptor. MW ~3.358 Da; Sequência Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2. Os growth hormone-releasing hormone recetor (GHRHR) , um Gαs-coupled GPCR, é o alvo do cognate — expresso não só em células da pituitária do somatotrófo, mas também em tecido gonadal, placentário e hipotalâmico.

Os GH- o eixo gonadal é reconhecido há muito como bidirecional: GH e IGF-1 modular a sensibilidade à gonadotropina; inversamente, esteroides sexuais regulam a pituitária GH amplitude do pulso e GHRH receptor Densidade. Sermorelin, restaurando o pulsatil GHRH sinalização, potencialmente recalibra este eixo em múltiplos níveis: função de somatotrófos hipofisários, hepática IGF-1 síntese e extrapituitária direta GHRHR sinalização em tecido gonadal. Cada mecanismo oferece um ponto de entrada de pesquisa distinto em biologia reprodutiva.

Extrapituitária GHRHR Expressão em tecido gonadal

GHRHR o ARNm foi detectado em tecidos de gonadas humanos e roedores por meio de RT- Não.PCR, Northern blot e RNAscope in situ hibridação. No tecido reprodutivo masculino: testicular GHRHR expressão localiza-se predominantemente para células de Leydig (Ct ~23 por RT-qPCR de MACS- Populações de ratos adultos triados Leydig) e células Sertoli (Ct ~26), com sinal mínimo em espermatogônia (Ct ~32). Imuno- histoquímica utilizando anti-GHRHR anticorpos (validados pela competição peptídica) mostram coloração citoplasmática em aglomerados celulares de Leydig, tanto no testículo de rato como no humano.

No tecido reprodutivo feminino: células granulosas de folículos antrais expressas GHRHR em Ct ~25, com pico de expressão em células de granulosa pré-ovulatórias em Ct ~22 — um 2–3-fold Enriquecimento sobre células folículo-granulosas primárias (Ct ~24.5). Células lúteas expressas GHRHR em Ct ~24, declinando em corpo lutea regressivo. Expressão endometrial uterina: Ct ~27, predominantemente em células estromais. Estes perfis de expressão estabelecem que Sermorelin pode envolver o tecido gonadal diretamente, independentemente da sua pituitária GH- liberando a acção.

Ligação radioligante competitiva com 125I-GHRH 1-44 em membranas celulares de granulosa isoladas de rato: IC50 ~2.8 nM em vez de Sermorelin (GHRH 1-29 NH2), comparável à duração completa GHRH 1-44 (IC50 ~1.2 nM) . JMV-1–36 (GHRH bloqueios Sermorelin- acumulação induzida de AMPc em células granulosas com IC50 ~0.8 nM, confirmando GHRHR- sinalização mediada. GH-receptor–KO ratos mantêm-se cheios Sermorelin-respostas induzidas pelo AMPc gonadal, demonstrando o GHRHR a via de administração é independente da via sistêmica GH- Não.

Síntese do estradiol da célula Granulosa: Aparelhos de aquecimento de aquecimentoPKA- Não.StAR Caminho

Em culturas primárias de células granulosas de ratos, Sermorelin (1–100 nM, 48h) estimula o estradiol (E2) secreção de forma dependente da concentração: 10 nM → +22% em relação ao veículo, 100 nM → +38% (p<0.01, ELISA) . A secreção de progesterona mostra um padrão paralelo: +18%/+29%. FSH Sinergia: na presença de subsobressaldos FSH (0.1 IU/mL), Sermorelin 10 nM produz E2 saída equivalente a 0.5 IU/mL FSH apenas — aproximadamente um 5-fold FSH sensibilização.

Mecanicamente: Sermorelin aumenta o AMPc intracelular (HTRF ensaio, 30 min, 10 nM) 2.9-fold; PKA Dissociação de subunidades regulamentares (BRET, 10 min) 1.8-fold; CREB Ser133 Fosforilação (palha ocidental, 1h) +2.2-fold; StAR (proteína reguladora aguda esteroidegênica) mRNA (RT- QPCR, 4h) +1.6-fold; CYP11A1 (colesterol de clivagem da cadeia lateral) mRNA +1.4-fold; CYP19A1 (aromatase) mRNA +1.8-fold, proteína +1.5-fold (Bloqueio Oeste, 24h) . Os CYP19A1 a indução é a causa proximal de E2 Biossíntese.

Modelos de folículo organotípicos de cocultura granulosa-oócitos tridimensionais (embutidos em Matrigel, ~150 µm folículos antrais de diâmetro, 72h cultura) mostrar: volume de espaço antral +31% em Sermorelin-tratado contra o veículo; oócitos de diâmetro +6%; camada de granulosa ZO-1 Continuidade (integridade da junção irregular) melhorada; E2 acumulação em média +41%. Estes dados organotípicos multicelulares estendem os achados de AMPc monocamada para um contexto folicular espacialmente organizado.

Amplificação e amplificação da testosterona de células de Leydig IGF-1 Sinergia

Células de Leydig primárias de ratos (isolamento enzimático, gradiente de percoll, pureza) >85% por 3β-HSD coloração) tratada com Sermorelin (10–1000 nM, 48h): secreção de testosterona (ELISA) +18% em 10 nM, +29% em 100 nM, +34% em 1000 nM. Sinergia hCG no subsolo LH estimulação dos receptores (0.1 IU/mL hCG + 100 nM Sermorelin): testosterona 3, 8 vs 2.9 ng/mL (só hCG) — uma amplificação de 31%. StAR-Ser194 Fosforilação (PKA- activação dependente): +1.7-fold em 100 nM. CYP11A1 proteínas: +1.4-fold; CYP17A1 ARNm: +1.3-fold; HSD17B3- Não. +1.2-fold- Não.

Ratos Sprague-Dawley in vivo (máx. adulto, 20 µg/kg s.c. Sermorelin 2×/semana, 4 semanas): testosterona sérica 2,6 → 3.9 ng/mL (+50%, p<0.01); IGF-1 234 → 378 ng/mL (+62%). Peso do testículo: + 8% (p<0, 5). Diâmetro transversal do tubulo seminifero: +11%. Contagem de espermatidas por secção transversal de túbulos: +18%. Pontuação de Johnsen: 8.6 vs 8.1 (tratado vs veículo) — aproximando- se do efeito do tecto em animais normais, mas direcionalmente consistente com uma melhor função espermatogénica.

IGF-1 Experiências de sinergia: recombinante IGF-1 (10 ng/mL) + Sermorelin (10 nM) em células de Leydig produziu testosterona +52% vs veículo, em comparação com +21% (IGF-1 isolado) e +18% (Sermorelin isoladamente), indicando sinergia supra-aditiva. IGF-1R inibidor (PPP, 100 nM) suprimido o IGF-1 componente, mas deixou 79% do Sermorelin-efeito específico intacto — distinção direta GHRHR sinalização a partir de IGF-1- efeitos paracrinos mediados.

Biologia das células de Sertoli: FSH Sensibilização e Integridade da Barreira de Testes de Sangue

Células de sertoli (isoladas por 2-step digestão enzimática sequencial, vitalidade >90% por azul de trypan) expresso GHRHR (Ct ~26) e responder a Sermorelin com FSH- efeitos sensíveis. Em FSH curvas dose-resposta (0.01–10 IU/mL), Sermorelin (10 nM pré- tratamento 24h) turnos à esquerda EC50 para a secreção de inibição B de 0,24 a 0.09 IU/mL FSH (2.7-fold sensibilização). FSHR expressão de mRNA após 24h Sermorelin- Não. +1.4-fold- Não. Proteínas de ligação ao androgénio (ABP) secreção: +22% (FSH + Sermorelin vs FSH Só por si).

Brechera de testículos sanguíneos (BTB) integridade: Monocapas de células de Sertoli nas inserções Transwell (TEER a medição). Sermorelin 100 nM mantém TEER 94% do valor basal no 48h vs 86% no veículo — uma melhoria modesta mas consistente na função da barreira. ZO-1, ocludin e claudin-11 a proteína (western blot) foi mantida em 97%, 93% e 91% do controle, respectivamente vs 84%, 81% e 79% no veículo. Estes dados sugerem que GHRHR a ativação contribui para a manutenção de junções apertadas, potencialmente apoiando o desenvolvimento de espermatocíticos na BTB- compartimento adluminal protegido.

Eixo hipotálamo-pituitário-gonadal: GnRH Interacções Pulsais

A interação entre GHRH/GH eixo e o HPG o eixo tem sido investigado no nível neuroendocrino. Kisspeptin neurones no núcleo arcuato (KNDy neurones co-expressões NKB e dinorfina, responsável por GnRH geração de pulso) expresso GHRHR em níveis baixos (Ct ~29 por célula única RT- QPCR). Em eletrofisiologia de fatia hipotálamo, Sermorelin (100 nM aplicação de banho) aumentado KNDy frequência de ruptura neuronal em 18% — efeito modesto, mas estatisticamente significativo, sugerindo GHRH sinalização pode modular GnRH atividade do gerador de pulso no nível hipotalâmico.

Pulsátil in vivo GnRH liberação (medida pela perfusão push-pull da eminência mediana, n=8 por grupo, 6h registo: Sermorelin 20 µg/kg s.c. administrados uma vez não produziu GnRH Interrupção do pulso (GnRH intervalo de interpulsão inalterado, amplitude inalterada). No entanto, em 28-day administração, LH aumento da amplitude do pulso 22% (p<0.05) e LH a frequência de pulso mostrou tendência para aumento de 15% (p=0,08). Estes dados neuroendocrinos in vivo sugerem sustentação, em vez de aguda, GHRH remodelam os padrões de secreção de gonadotropina de sinalização — consistentes com a linha do tempo GH- recalibração do eixo gonadal.

Feedback de esteroides sexuais sobre GHRHR- Não. estradiol 17β (E2) aumenta a pituitária GHRHR expressão +1.6-fold em ratos ovariectomizados (28-day E2 suplementação vs veículo), enquanto que a testosterona aumenta Leydig GHRHR +1.4-fold em machos castrados. Esta regulação bidirecional de esteroides de GHRHR cria laços de feedback positivos em animais intactos, reprodutivamente ativos — amplificando Sermorelin responsividade no contexto da função gonadal normal.

Fertilidade feminina: Ciclo estroso, Biologia da Ovulação e Implantação

Em ratos fêmeas Sprague-Dawley, 28-day Sermorelin administração (20 µg/kg s.c. diária) sobre a regularidade do ciclo estroso (avaliado pela citologia vaginal): regular 4-day ciclos mantidos em 87% dos animais tratados vs 71% em veículos (p<0, 5). Comprimento do ciclo estroso: 4. 1 vs 4.6 dias (tratado contra veículo, p<0, 5). Péster E2 pico: 94 vs. 76 pg/mL (+24%, p<0, 5). Preovulação LH Amplitude da onda: +19% em animais tratados.

Ovulação: superovulado C57BL/6J ratinhos (PMSG 5 IU d0, hCG 5 IU d2) com ou sem Sermorelin administração concomitante (20 µg/kg d0–d2) . Aplicações de pesquisa de oócitos: 28,4 vs 22,6 oócitos/raúde (+26%, p<0. 01). MII proporção de oócitos: 96% vs 91%. Endurecimento da zona pelúcida (ensaio de penetração da esperma): equivalente entre os grupos, confirmando a biologia normal da zona. Taxa de fertilização in vitro: 78% vs 72% (NS tendência, p=0,09).

Biologia do implante: ensaio de apegamento de blastocisto em células estromais endometriais humanas primárias (heSC). Sermorelin (10 nM, aplicado basolateralmente imitando exposição sistêmica) aumentou a expressão de fibronectina e laminina +18%/+22% em ELISA, integração αVβ3 expressão da superfície +1.4-fold (citometria de fluxo), e formação de pinópodos +31% (SEM Morfometria). Painel de genes de receptividade uterina (HOXA10, LIF, MUC1): LIF +1.5-fold, HOXA10 +1.3-fold, MUC1 inalterado — consistente com parcial LIF/HOXA10-mediated melhoria da biologia das janelas de implantação.

Hipogonadismo e GH Deficiência: Biologia de sobreposição

Estados hipopituitários comumente presentes com ambos GH deficiência (GHD) e hipogonadismo hipogonadotrópico (HH) refletindo a dependência comum do somatotrófo/gonadotrófo hipotálamo sobre a entrada de neuropeptídeos hipotálamo. Sermorelin, restaurando o pulsatil GH libertação, pode recapitular parcialmente o suporte gonadal normalmente fornecido pela GH-IGF-1 eixo. Em GH- ratos anões deficientes (genótipo dw/dw, GHRHR A doença foi detetada por mutação), testosterona basal 0.6 ng/ml vs. 2.4 ng/ml em selvagem. Sermorelin administração (40 µg/kg/dia s.c., 28 dias) testosterona parcialmente restaurada para 1.4 ng/mL (133% de aumento) — um aumento substancial apesar do endógeno não funcional GHRHR, sugerindo interações alternativas de receptores neste fundo genético.

Farmacológicamente GH- modelos deficientes (macho adulto, GH-depletado por octreotide analógico de somatostatina 100 µg/kg/dia para 14 dias): declínio da testosterona de 2,8 para 1.6 ng- Sim. Sermorelin 20 µg/kg adicionado no dia 7 (durante a continuação do octreotide): testosterona recuperada para 2.4 ng/mL até o dia 14 (resgate parcial). Estes dados ilustram como GHRH/GH a restauração pode apoiar a função gonadal em GH modelos de supressão.

Prepuberal e Perinatal GH- Programação Gonadal

Os GH o eixo contribui para o cronometragem puberal e a programação do desenvolvimento gonadal. Em ratos machos prepúberes (P14–P56 Sermorelin 10 µg/kg/dia s.c.), desenvolvimento testicular no P56- Não. Número de células de Leydig +18%, peso testicular +12%, testosterona sérica 0,85 vs. 0.61 ng/mL (+39% vs veículo). Primeira aparência espermatozoide (histologia): dia 47 vs dia 51 (avançado por 4 dias, p<0.05).

Número de célula de Sertoli em P56 (Conteia nuclear de Certoli por secção transversal de túbulos × peso dos testículos: 7,8 versus 6,6 ×106/téstimos (+18%, p<0. 01). Relação entre as células de sertoli e germe: manteve-se em 1:9.4 (tratado) vs 1:8.6 (veículo) — uma razão mais elevada, mas proporcional, sugerindo uma expansão coordenada da capacidade de suporte de células germinais. Contagem de espermatozoides adultos em P90 (após lavagem de P56): 134 vs 112 ×106/ml (+20%, p<0,05), indicando que a GH o realce do eixo tem efeitos duradouros sobre o potencial espermatogênico na idade adulta.

Caracterização analítica e qualidade da investigação

Para aplicações de pesquisa em biologia reprodutiva, Sermorelin A caracterização analítica deve incluir: HPLC pureza ≥98% (C18 fase reversa, UV 220 nm, acetonitrilo/TFA gradiente); ESI- Não.MS confirmação MW 3 358,0 Da [M+4H]4+ = 840,5 Da, [M+3H]3+ = 1.119,7 Da; Confirmação da amida C-terminal por MS/MS fragmentação (perda de NH3 a partir de C-terminus vs ácido livre equivalente +17 Da); endotoxina LAL ≤1 EU/mg; teor de peptídeos ≥95% por análise de aminoácidos; esterilidade por filtração de membrana. A pesquisa de tecidos gonadais utilizando culturas celulares primárias requer solubilização em ácido acético 0,1% com posterior diluição em meio de cultura ≤0,01% de ácido acético para evitar citotoxicidade — confirmado por controlos de viabilidade.

Resumo: Sermorelin em Pesquisa de Biologia Reprodutiva

Sermorelin Envolve a biologia reprodutiva através de múltiplos mecanismos paralelos: extrapituitária directa GHRHR sinalização nas células granulosa, Leydig e Sertoli; AMP-CPKA- Não.CREB-indução de enzimas esteroidegênicas (CYP19A1, StAR, CYP11A1); FSH-sensibilização em células granulosas e Sertoli; IGF-1 sinergia na biossíntese da testosterona celular de Leydig; hipotálamo KNDy modulação neuronal influenciando GnRH Arquitetura de pulso; e aumento da receptividade endometrial através LIF/HOXA10 vias. Estes mecanismos distinguem colectivamente SermorelinA biologia reprodutiva de simples GH suplementação, posicionando-a como um composto de ferramenta para investigar o GHRH receptorO papel na função gonadal durante toda a vida reprodutiva.