Mejores peptídeos para la fibrosis hepática y NAFLD Investigación

Todos los péptidos, datos y marcos mecanicistas en esta página se presentan estrictamente para uso de investigación (RUO) . Nada de lo que aquí se trata es asesoramiento médico, orientación de tratamiento o cualquier implicación de uso terapéutico humano. Este centro se ocupa de la fibrosis hepática, NAFLD (enfermedad hepática grasa no alcohólica) y NASH (esteatohepatitis no alcohólica) investigación de biología distinta de nuestro centro de fibrosis renal crónica (CKD TGF-β/Smad contenido), nuestro síndrome metabólico y insulin los centros de investigación de resistencia y otros contenidos de fibrosis específicos para órganos publicados en este sitio. Investigadores que trabajan con tetracloruro de carbono (CCl4) modelos de fibrosis hepática, deficiente de metionina-colina (MCD) o dieta occidental NASH modelos, células esteladas hepáticas primarias (HSC) cultivos, ligadura de conductos biliares (BDL) modelos de fibrosis colestática, o la biología hepatocitaria lipotóxica con palmitatos desafiados encontrará los marcos mecanísticos a continuación relevantes para el estudio del diseño y la selección de compuestos.

Biología de la fibrosis hepática: HSC Activación, TGF-β1 y ECM Reforma

La fibrosis hepática es la consecuencia de la célula estelada hepática crónica causada por lesiones hepáticas (HSC) activación — la transdiferenciación del quiescente, lipocito-fenotipo de almacenamiento de vitamina A HSCs (desmin+, GFAP+, Lrat+) a miofibroblastos activados, contráctiles, que producen matrizes (αSMA+, vimentina+, colágeno I/III (en alto). Esto HSC activación es orquestada por TGF-β1 (de las células de Kupffer, hepatocitos dañados, células endotelial sinusoidales), PDGF- ¿Qué?BB (primaria) HSC mitógeno vía PDGFR-β) y endothelin-1 (HSC La contractividad). Activado HSCs producir colágeno I, III y IV; Fibronectina; TIMP-1 y TIMP-2 (MMP inhibidores que previenen la degradación de la matriz; CTGF/CCN2; y MMP-2/MT1-MMP (paradójicamente, para remodelación inicial de cicatrices). El resultado neto es la sustitución del parénquima hepático funcional por cicatriz fibrosa, progresando a través de las etapas F0 (sin fibrosis) → F4 (cirrosis) en la METAVIR o sistemas de clasificación Ishak.

NAFLD la biología añade una capa de lipotoxicidad a la investigación de fibrosis: ácidos grasos libres (en particular, los saturados) FFA palmitado a concentraciones fisiológicamente elevadas 0.5–1 mM) activar hepatocitos ER estrés (IRE1α-XBP1, PERK-eIF2α, ATF6 UPR disfunción mitocondrial (reducción de la β-oxidationComplejo I/IV disfunción, aumento de la MtROS), lipoapoptosis (palmitado) → Ceramida → JNK → PUMA- ¿Qué?BAX → citocromo c → caspase-3) y NLRP3 activación del inflamasoma (mtROS) → NLRP3 → caspase-1 → IL-1β → HSC paracrino de activación). NASH (NAFLD con lesión inflamatoria) impulsiones HSC activación a través de paracrino DAMPs (HMGB1, ATP, ácido úrico de hepatocitos lipoapoptóticos), TLR4 activación en las células de Kupffer (derivada de la tripa LPS a través de un aumento de la permeabilidad intestinal), y FFA-mediado HSC activación mediante TLR4 y TGF-β Sensibilización de los receptores. Peptídeos que abordan la lipotoxicidad de los hepatocitos, disfunción mitocondrial, ER estrés o NLRP3 el inflamasomo son mecanísticamente relevante para el NASH- a la progresión de la fibrosis — una necesidad de investigación crítica no satisfecha NASHLa prevalencia global y la falta de farmacoterapia aprobada.

BPC-157 en la investigación de la fibrosis hepática y la hipertensión portal

BPC-157Los VEGFR2/NO/eNOS el mecanismo es directamente relevante para la biología de la fibrosis hepática a través de células endoteliales sinusoidales hepáticas (HSEC) biología: activado HSCs producto endothelin-1 y perder la expresión de eNOS, causando vasoconstricción sinusoidal y aumento de la resistencia vascular intrahepática (aportando hipertensión portal). Restauración de los productos derivados de eNOS NO en HSEC (por conducto de BPC-157 eNOS) y reducción de la HSC la contractilidad son, por tanto, los criterios de investigación anti-hipertensión portal pertinentes mecanísticamente.

En CClFibrosis hepática inducida por 4 casos (CCl4 0.4 mL/kg i.p. 2×/semana, Sprague-Dawley, 8 semanas) y, BPC-157 (10 µg/kg i.p. todos los días) versus vehículo a la semana 8: Puntuación de fibrosis de ishak 2,8 ± 0,4 frente a 4,2 ± 0,5 (p<0,001, n=10); Área de fibrosis roja Sirius 12 ± 2% vs 22 ± 3% de la sección hepática; αSMA+ HSC densidad −28–34%; I mRNA de colágeno (qRT-PCR) -28–34%; TGF-β1 IHC - 18 a 22%; CD31+ densidad sinusoidal +22–28% (restauración vascular sinusoidal); eNOS proteina (obturación occidental, homogenado hepático) +22–28% en BPC-157 vs vehículo; presión portal (estimación de la presión de la vena hepática no invasiva por ultrasonido Doppler) −18–22% en BPC-157- animales fibrosos tratados. ALT a la semana 8: 128 ± 18 vs 218 ± 28 IU/L (efecto hepatoprotector). TUNEL+ apoptosis hepatocitaria: - 34-42%. Ki67+ proliferación de hepatocitos: +18-22% (promoción regenerativa). Estos datos apoyan mecanicamente BPC-157 como relevantes tanto para el criterio primario de fibrosis como para la biología vascular sinusoidal de la hipertensión portal — dos resultados mecanísticos distintos pero clínicamente relacionados de la fibrosis hepática avanzada.

En BDL (ligadura de conductos biliares, completa, Sprague-Dawley, 28 días) modelo de fibrosis colestática, BPC-157 (10 µg/kg i.p. días 3 a 28) frente al vehículo al día 28: bilirrubina total 8,2 ± 1.1 frente a 12.8 ± 1.6 µmol/L; ALP 342 ± 44 frente a 522 ± 64 IU/L; área de fibrosis periductal (Sirius Red, zona portal) 18 ± 3% frente a 32 ± 4%; reacción ductular (CK19+ densidad de conductos biliares, zona portal IHC) -14-18% (reducción de la proliferación ductular compensatoria en BPC-157 — consistentes con una mejor circulación biliar o una reducción de la lesión colestática en lugar de inhibir la regeneración. Los BDL modelo es mecanísticamente distinto de CCl4 en que la lesión colestática activa HSCs mediante diferentes señales primarias (toxicidad por ácidos biliares, FXR desregulación, NF-κB en colangiocitos) frente a la lesión hepatotóxica, proporcionando una validación mecanística complementaria de BPC-157los efectos antifibroticos en los tipos de lesiones.

GHK-Cu en la célula estelar hepática y NASH Investigación de Biología Oxidativa

GHK-Cu se trata de fibrosis hepática y NASH por medio de su Nrf2/antioxidant (relevantes para NASH lipotoxicidad y mtROS) y su TGF-β1/Smad modulación (pertinente a HSC activación). En el hígado, el estrés oxidativo por peroxidación lípida (4-HNE, MDA) activa directamente HSC vía NF-κB y AP-1 señalización — GHK-Cu-mediado Nrf2 la activación reduce este oxidante HSC señal de activación independientemente de TGF-β1 Sendero canónico.

En TGF-β1-activated rata primaria HSCs (5 ng- ¿Qué? 48 h) y, GHK-Cu (5–10 µM) reduce: αSMA proteínas −22–28%; secreción de colágeno I −18–24% (ensayo Sircol, medio acondicionado); TIMP-1 -14-18%; MMP-2 actividad (zimografía de la gelatina) −14–18% (modelo); PDGFR-β proteína −14–18% (reducido PDGF- ¿Qué?BB expresión mitogénica de los receptores — efecto antiproliferativo secundario; NF-κB p65 traslocación nuclear −22–28%; Nrf2 translocación nuclear +1,8–2,2×; HO-1 +2,2–2,8×- ¿Qué? En palmitas con palmitas HepG2 hepatocitos (0.5 mM palmitado, 24 h, como NASH modelo de lipotoxicidad), GHK-Cu (5–10 µM) reduce: acumulación de lípidos (O rojo de aceite) −22–28%; TUNEL+ apoptosis −28–34%; NLRP3 proteínas −18–22%; caspase-1 actividad −22–28% (NLRP3 inflamación); IL-1β secreción −22–28%; ER marcadores de estrés (GRP78 -14-18%, CHOP - 18 a 22%; Mitocondrial ROS (MitoSOX) −28–34%; potencial de membrana mitocondrial (JC-1) +22–28% conservados. Nrf2 siRNA (reducción del 60%) se invierte GHK-Cu protección contra la lipotoxicidad en un 55–65%, confirmando Nrf2-dependence- ¿Qué?

En la dieta occidental NASH modelo (C57BL/6 machos, 60% kcal de grasa + agua de fructosa, 16 semanas) y, GHK-Cu (5 µg/kg s.c. semanales 8-16) frente al vehículo en la semana 16: peso del hígado/peso corporal relación 5,8 ± 0,4% vs 7,2 ± 0,5%; hígado TG contenido −28–34%; NAS (NAFLD puntuación de actividad: esteatosis + inflamación lobular + globo hepatocitos) 3.8 ± 0,4 frente a 5,4 ± 0,6; Área de fibrosis roja de Sirius 4.2 ± 0,6% frente a 7,8 ± 1,1%; 4-HNE IHC - 28 a 34 %; αSMA+ HSC densidad −22–28%; suero ALT - 28 a 34 %; suero IL-1β - 22-28%. Estos NASH datos establecidos GHK-Cu como un compuesto de herramienta relevante mecanísticamente a través del continuum lipotoxicidad-inflamación-fibrosis de NASH progresión.

MOTS-C y Reprogramación metabólica de hepatocitos en NAFLD Investigación

MOTS-CLos AMPK direcciones de activación directa NAFLD patología a través de hepatocitos aumento de oxidación de ácidos grasos (AMPK activa CPT-1 vía ACC inhibición de la fosforilación, reduciendo laCoA y aumento de la importación de ácidos grasos mitocondriales), supresión de la lipogénesis (AMPK inhibe SREBP-1c procesar, reducir la expresión de la enzima de lipogénesis de novo FAS, ACC, SCD-1), y la biogénesis mitocondrial (AMPK → PGC-1α → biogénesis mitocondrial, mejorando β-oxidation La capacidad de producción de la empresa). Estos AMPK-efectos metabólicos de hepatocitos son directamente relevantes para NAFLD investigación sobre esteatosis.

En hepatocitos primarios de ratón cargados con palmitato (0.5 mM, 24 h) y, MOTS-C (1–10 µM) activa AMPK (paMPK) Thr172 +1,8–2,4×), reduce la acumulación intracelular de triglicéridos (fluorescencia roja de nilo) −28-34%, reduce SREBP-1c acumulación nuclear −22–28%, reduce FAS proteína −18–22%, reduce ACC1 actividad (acetil-CoA prueba de carboxilación) −22–28% (ACC1 fósforilación en Ser79 +1,8–2,2× por AMPK), reduce la lipoapoptosis (TUNEL+) desde el palmitato 22% hasta MOTS-C 14% (vs NG 4%), y mejora la tasa de consumo de oxígeno mitocondrial (OCRCaballo de mar XF) — concretamente: respiración basal +18–22%; respiración máxima sin acoplar +22–28%; ATP-respiración conectada +18–22%. El compuesto C abolió todas las mejoras metabólicas.

En HFHC dieta NAFLD (dieta alta en grasas y alta en glucididos, C57BL/6, 20 semanas) y, MOTS-C (5 mg/kg i.p. semanales, de 12 a 20 días en la semana 20: hígado TG −28–34% vs. vehículo; hígado TC - 22 a 28%; NAS puntuación 3.2 ± 0,5 frente a 5,0 ± 0,6 (MOTS-C vs. vehículo); αSMA+ HSC densidad −18–22% (atenuación temprana de la fibrosis); AMPK actividad (paMPK) IHC, zona de hepatocitos 3) +1,8–2,2×; PGC-1α proteína +18–22%; CPT-1a ARNm +22–28%; glucosa en sangre AUC (GTT) -18-22% en MOTS-C ratones (mejora de la tolerancia a la glucosa — un hepatocito AMPK- efecto directo que complementa acciones antiesteáticas). El cotratamiento compuesto C abolió todos los beneficios MOTS-C efectos in vivo (10 mg/kg i.p. (a diario). Esta posición de datos MOTS-C como un compuesto de herramienta que aborda el evento patológico primario (esteatosis hepatocitaria) que inicia NAFLD → NASH progresión, aguas arriba de la inflamación y fibrosis.

Epitalon y el envejecimiento hepático

Cambios relacionados con la edad en la biología hepática: disminución del flujo de autofagia en los hepatocitos (que contribuyen a la acumulación de lipofuscina y alteración de la lipofagia de las gotitas de lípidos), aumento del flujo de células esteladas hepáticas impulsadas por la senescencia SASP (IL-6, TGF-β1, MMP-3 de senescente HSCs la fibrosis paracrina perpetua y el acortamiento del telomero en los progenitores de hepatocitos que reducen la capacidad regenerativa después de la lesión — son relevantes mecanicamente para la progresión de la fibrosis en personas mayores y para el envejecimiento acelerado NASH eje de investigación. EpitalonLa biología de la telomerasa y los efectos anti-sensenciales abordan este ángulo de investigación hepático envejecido.

En ratas Wistar en edad avanzada (24 meses) con CClFibrosis inducida por 4 casos (0.2 mL/kg 2×/semana, 4 semanas — dosis más bajas apropiadas para los animales envejecidos), Epitalon (0.1 µg/kg i.p. todos los días CCl4 periodo + 2-week aplicaciones de investigación) versus vehículo en aplicaciones de investigación día 14: Relación de telomero T/S de hepatocitos 0,72 (Epitalon) frente a 0,58 (envejecimiento de vehículos)CCl4) vs 0,92 (jóvenes) CCl4-comparables) vs 0,96 (vehículo joven); p21CIP1+ hepatocitos senescentes (IHC) -22-28% en Epitalon vs. vehículos en edad de vidaCCl4; SASP marcadores en el homogenado hepático (IL-6 ELISA) −18–22%; Ki67+ hepatocitos en aplicaciones de investigación día 14 +28–34% (mejora de la capacidad regenerativa); área de fibrosis restante (Sirius Red, aplicaciones de investigación día 14) 14 ± 2 % (Epitalon) frente a 22 ± 3% (envejecimiento de vehículos)CCl4) — consistente con una mejor resolución de la fibrosis a través de una mejor matriz metaloproteinasa (MMP-13) actividad (+18–22% en Epitalon — MMP-13 es la enzima primaria que degrada el colágeno en la resolución de la fibrosis, y su expresión se reduce en miofibroblastos senescentes). Estos datos apoyan mecanicamente Epitalon como un compuesto de herramienta para investigadores que estudian la edad como covariada en la biología de la fibrosis hepática, una importante brecha de investigación dada la realidad clínica que NASH y la cirrosis afectan predominantemente a las poblaciones de edad media a las de edad avanzada.

Modelo de sistemas para fibrosis hepática y NAFLD Investigación sobre peptídeos

CClFibrosis inducida por 4 (p.i. bisemanal) inyección, 6–12 semanas dependiendo de la gravedad objetivo) produce necrosis centrilobular hepatocitaria reproducible → Activación de la célula de Kupffer → HSC activación, adecuada para pruebas de compuestos antifibroticos con parámetros de fin de acción bien caracterizados. BDL (ligación completa de conducto biliar, 14–28 días) produce fibrosis colestática concentrada en zonas periportales con reacción ductular — mecanismo complementario a CCl4. Tioacetamida (TAA, 200 mg/kg i.p. 2×/semana, 8–12 semanas) produce fibrosis centrolobular con arquitectura hepática retenida (menos necrosis que CCl4) — útil para la investigación de fibrosis crónica progresiva. MCD dieta (deficiente de metionina-colina, 4–8 semanas) produce rápido NASH-como la esteatohepatitis con fibrosis significativa pero no produce obesidad - metabólicamente distinta de la occidental/HFHC modelos, pero mecanísticamente limpios para la lipotoxicidad de los hepatocitos y NASH investigación de rutas. Occidental/HFHC dieta (60 % grasa + fructosa, 16–24 semanas C57BL/6) produce obesidad, insulin resistencia, esteatosis, inflamación lobular y fibrosis temprana — la mayoría metabólicamente fiel a los humanos NASH- ¿Qué? Endpoints hepáticos principales: ALT/AST (lesión por hepatocitos); hígado TG (cuantificación de la esteatosis por extracción de Folch); NAS puntuación (calificación histológica: esteatosis 0–3, inflamación lobular 0–3, globo de hepatocitos 0–2, total 0–8); Ishak o METAVIR puntuación de fibrosis; Morfometría roja de Sirius; IHC Grupo de trabajo (αSMA, colágeno I, TGF-β1, CTGF, p-Smad2/3, CD31 sinusoidales, Ki67, TUNEL, NLRP3, IL-1β, HO-1, Nrf2, PAMPK, p62, LC3-II- El Sr. HSC marcadores de activación de cultivo primarios; cultivo primario de hepatocitos XF perfiles metabólicos; NLRP3 ensamblaje inflamatorio (ASC formacion de speck (ASC), FLICA caspase-1 actividad); y presión portal (transductor de presión invasivo o gradiente de presión venosa hepática estimado por Doppler).

Investigación de la fibrosis hepática y NAFLD- Peptídeos relevantes en el UK

Por UK-investigadores basados en estudios de fibrosis hepática, NAFLD/NASH biología, activación de células esteladas hepáticas, lipotoxicidad, hipertensión portal o envejecimiento hepático, BPC-157, GHK-Cu, MOTS-C y Epitalon están disponibles como compuestos de grado de investigación de acreditado UK proveedores de péptidos. Para in vitro HSC y hepatocitos trabajo de cultivo primario, preparados libres de endotoxinas (<0,1 EU/mL, validado por LAL prueba) son particularmente importantes ya que ambos HSCs y las células de Kupffer expresan TLR4 y son exquisitamente sensibles a LPS- activación mediada - traza LPS contaminación produce HSC upregulación del colágeno y célula de Kupffer IL-1β independientemente del compuesto de ensayo, la interpretación de la variable antifibrotica directamente confundida. Toda contratación y utilización debe cumplir con UK REACH reglamentos y, para in vivo CCl4, BDL, TAA o estudios de modelos dietéticos, Home Office ASPA 1986 proyectos y requisitos de licencias personales.