Melhores peptídeos para fibrose hepática e NAFLD Investigação

Todos os peptídeos, dados e quadros mecânicos nesta página são apresentados estritamente para uso de pesquisa apenas (RUO) . Nada aqui constitui conselho médico, orientação terapêutica ou qualquer implicação de uso terapêutico humano. Este centro trata da fibrose hepática, NAFLD (doença hepática gorda não alcoólica) e NASH (esteato-hepatite não alcoólica) pesquisa de biologia distinta do nosso centro de fibrose renal crônica (CKD TGF-β/Smad conteúdo), nossa síndrome metabólica e insulin os centros de pesquisa de resistência e outros conteúdos de fibrose específicos para órgãos publicados neste site. Pesquisadores que trabalham com tetracloreto de carbono (CCl4) modelos de fibrose hepática, deficientes em metionina- colina (MCD) ou dieta ocidental NASH modelos, células estelatas hepáticas primárias (HSC) culturas, ligadura de ductos biliares (BDL) modelos de fibrose colestática, ou biologia hepatócita lipotóxica com desafios de palmitate, encontrarão os quadros mecânicos abaixo relevantes para o estudo de projeto e seleção de compostos.

Biologia da fibrose hepática: HSC Activação, TGF-β1 e ECM Remodelação

A fibrose hepática é a consequência da célula estelata hepática crónica causada por lesão hepática (HSC) ativação — a transdiferenciação do fenótipo-lipócito queescente, de vitamina A-estivação HSCs (desmin+, GFAP+, Lrat+) para miofibroblastos ativados, contráteis, que produzem matriz (αSMA+, vimentina+, colágeno I/III Alto). Isto HSC ativação é orquestrada por TGF-β1 (a partir de células de Kupffer, hepatocitos danificados, células endoteliais sinusoidais), PDGF- Não.BB (primaria) HSC mitógeno via PDGFR-β) e endothelin-1 (HSC A concordância é a única forma de concordância. Activado HSCs produzir colágeno I, III e IV; Fibronectina; TIMP-1 e TIMP-2 (MMP os inibidores que impeçam a degradação da matriz; CTGF/CCN2; e MMP-2/MT1-MMP (paradoxalmente, para remodelação inicial da cicatriz). O resultado líquido é a substituição do parênquima hepático funcional por cicatriz fibrótica, evoluindo através dos estágios F0 (sem fibrose) → F4 (cirrose) na METAVIR ou sistemas de classificação Ishak.

NAFLD a biologia adiciona uma camada de lipotoxicidade à pesquisa de fibrose: ácidos gordos livres (em especial, os ácidos saturados) FFA palmitate em concentrações fisiologicamente elevadas 0.5–1 mM) activar hepatócitos ER stress (IRE1α-XBP1, PERK-eIF2α, ATF6 UPR vias), disfunção mitocondrial (redução β-oxidation, Complexo I/IV disfunção, aumento da MtROS), lipoapoptose (palmitato) → Ceramida → JNK → PUMA- Não.BAX → citocromo c → caspase-3) e NLRP3 ativação do inflamassoma (mtROS) → NLRP3 → caspase-1 → IL-1β → HSC paracrino de ativação). NASH (NAFLD com lesão inflamatória) impulsões HSC ativação através de paracrino DAMPs (HMGB1, ATP, ácido úrico de hepatocitos lipoapoptóticos), TLR4 ativação em células de Kupffer (derivadas do intestino) LPS via permeabilidade intestinal aumentada), e FFA-mediado HSC activação via TLR4 e TGF-β Sensibilização dos receptores. Peptídeos que abordam lipotoxicidade hepatocítica, disfunção mitocondrial, ER stress ou NLRP3 o inflamassoma é mecanicamente relevante para a NASH-a progressão da fibrose — uma necessidade de pesquisa crítica não satisfeita dada NASHA prevalência global e a falta de farmacoterapia aprovada.

BPC-157 em pesquisa de fibrose hepática e hipertensão portal

BPC-157Não, não. VEGFR2/NO/eNOS o mecanismo é diretamente relevante para a biologia da fibrose hepática através de células endoteliais sinusoidais hepáticas (HSEC) Biologia: activado HSCs produtos endothelin-1 e perder a expressão de eNOS, causando vasoconstrição sinusoidal e aumento da resistência vascular intra-hepática (contribuindo para hipertensão portal). Restauração do eNOS derivado NO em HSEC (através de BPC-157 Regulamentação eNOS) e redução HSC a contratilidade são, portanto, objetivos de pesquisa anti-hipertensão portais mecanísticamente pertinentes.

Em CClFibrose hepática induzida por 4 casos (CCl4 0.4 mL/kg i.p. 2×/semana, Sprague-Dawley, 8 semanas) e BPC-157 (10 µg/kg i.p. diária em todo o) versus veículo na semana 8: Pontuação da fibrose de ishak 2,8 ± 0, 4 vs 4, 2 ± 0, 5 (p<0,001, n=10); Área de fibrose vermelha Sirius 12 ± 2% vs 22 ± 3% da secção hepática; αSMA+ HSC densidade −28-34%; ARNm colágeno I (qRT-PCR) -28-34%; TGF-β1 IHC -18-22%; CD31+ densidade sinusoidal +22–28% (restauração vascular sinusoidal); Proteína eNOS (obstrução ocidental, homogenado hepático) +22–28% em BPC-157 vs veículo; pressão portal (estimação de gradiente de pressão venosa hepática não invasiva por ultrassom de Doppler) −18–22% em BPC-157- animais fibróticos tratados. ALT na 8a semana: 128 ± 18 vs 218 ± 28 IU/L (efeito hepatoprotetor). TUNEL+ apoptose hepatocítica: - 34-42%. Ki67+ proliferação de hepatocitos: +18-22% (promoção regenerativa). Estes dados suportam mecanicamente BPC-157 como relevante tanto para o objetivo primário da fibrose quanto para a biologia vascular sinusoidal da hipertensão portal — dois desfechos mecanicamente distintos, mas clinicamente relacionados, da fibrose hepática avançada.

Em BDL (ligação de ducto biliar, completa, Sprague-Dawley, 28 dias) modelo de fibrose colestática, BPC-157 (10 µg/kg i.p. dias 3 a 28) versus veículo no dia 28: bilirrubina total 8,2 ± 1,1 vs 12,8 ± 1.6 µmol/L; ALP 342 ± 44 vs 522 ± 64 IU/L; área de fibrose peridutal (Sirius Red, zona portal) 18 ± 3% versus 32 ± 4%; reacção ductular (CK19+ densidade do ducto biliar, zona portal IHC) -14-18% (redução da proliferação ductular compensatória em BPC-157 — consistente com uma melhor circulação biliar ou com uma redução da lesão colestática, em vez de inibir a regeneração. Os BDL modelo é mecanicamente distinto de CCl4 no que a lesão colestática ativa HSCs através de diferentes sinais primários (toxicidade por ácidos biliares, FXR desregulação, NF-κB em colangiócitos) versus lesão hepatotóxica — fornecendo uma validação mecanística complementar de BPC-157Os efeitos anti-fibróticos em todos os tipos de lesões.

GHK-Cu em Célula Hepática Stelate e NASH Pesquisa de Biologia Oxidativa

GHK-Cu e a fibrose hepática e NASH através do seu Nrf2/antioxidant Mecanismo (relevante para NASH A utilização de um sistema de controlo de qualidade é considerada uma das seguintes características: TGF-β1/Smad modulação (relevante para HSC Ativação). No fígado, estresse oxidativo por peroxidação lipídica (4-HNE, MDA) activa directamente HSC via NF-κB e AP-1 sinalização — GHK-Cu-mediado Nrf2 a ativação reduz este oxidativo HSC sinal de ativação independentemente de TGF-β1 Via canônica.

Em TGF-β1-activated ratos primários HSCs (5 ng- Sim. 48 h) e GHK-Cu (5–10 µM) reduz: αSMA proteínas −22–28%; secreção de colágeno I −18–24% (ensaio Sircol, meio condicionado); TIMP-1 -14-18%; MMP-2 actividade (zimografia por gelatina) −14-18% (modelo); PDGFR-β proteínas −14-18% (reduzida PDGF- Não.BB expressão mitogénica dos receptores — efeito anti-proliferativo secundário; NF-κB p65 translocação nuclear −22–28%; Nrf2 translocação nuclear +1,8–2,2×; HO-1 +2,2–2,8×- Não. Em palmitas com desafios de palmitas HepG2 hepatocitos (0.5 mM palmitate, 24 h, assim como NASH modelo de lipotoxicidade), GHK-Cu (5–10 µM) reduz: acumulação de lipídios (O vermelho de óleo) −22–28%; TUNEL+ apoptose −28-34%; NLRP3 proteínas −18–22%; caspase-1 actividade −22–28% (NLRP3 inflamação); IL-1β secreção −22–28%; ER marcadores de tensão (GRP78 -14-18%, CHOP - 18 a 22%; Mitocondrial ROS (MitoSOX) −28-34%; potencial da membrana mitocondrial (JC-1) +22–28% conservados. Nrf2 siRNA inverte o rumo abaixo (redução de 60%) GHK-Cu protecção contra lipotoxicidade em 55-65%, confirmando Nrf2-dependence- Não.

Na dieta ocidental NASH Modelo (C57BL/6 machos, 60% kcal gordura + água de frutose, 16 semanas) e GHK-Cu (5 µg/kg s.c. diária, semanas 8-16 versus veículo na semana 16: peso do fígado/peso corporal 5,8 ± 0,4% vs 7,2 ± 0,5%; fígado TG teor −28-34%; NAS (NAFLD escore de atividade: esteatose + inflamação lobular + balões hepatocóticos) 3,8 ± 0, 4 vs 5, 4 ± 0.6; Área de fibrose vermelha de Sirius 4,2 ± 0,6% versus 7,8 ± 1,1%; 4-HNE IHC -28-34%; αSMA+ HSC densidade −22–28%; soro ALT -28-34%; soro IL-1β - 22-28%. Estes NASH dados estabelecidos GHK-Cu como um composto de ferramenta relevante mecanicamente através do continuum lipotoxicidade-inflamação-fibrose de NASH progressão.

MOTS-C e Reprogramação Metabólica de Hepatocytes em NAFLD Investigação

MOTS-CNão, não, não, não, não, não. AMPK endereços de ativação diretamente NAFLD patologia através do aumento da oxidação do ácido graxo hepatocótico (AMPK activa CPT-1 via ACC inibição da fosforilação, reduzindo aCoA e aumento da importação de ácidos graxos mitocondriais), supressão da lipogênese (AMPK inibe SREBP-1c processamento, redução da expressão de novo lipogênese enzima — FAS, ACC, SCD-1), e a biogênese mitocondrial (AMPK → PGC-1α → biogênese mitocondrial, melhorando β-oxidation capacidade). Estes AMPK- os efeitos metabólicos dos hepatocitos são directamente relevantes para NAFLD pesquisa de esteatose.

Em hepatocitos primários de rato carregados com palmitate (0.5 mM, 24 h) e MOTS-C (1–10 µM) activa AMPK (pampk) Thr172 +1,8–2,4×), reduz o acúmulo intracelular de triglicéridos (fluorescência vermelha de Nilo) −28-34%, reduz SREBP-1c acumulação nuclear −22–28%, reduz FAS proteínas −18-22%, reduz ACC1 actividade (acetil-CoA ensaio de carboxilação) −22–28% (ACC1 Fosforilação em Ser79 +1,8–2,2× por AMPK), reduz a lipoapoptose (TUNEL+) de palmitate 22% a MOTS-C 14% (vs NG 4%), e melhora a taxa de consumo de oxigênio mitocondrial (OCR, Cavalo-marinho XF) — especificamente: respiração basal +18–22%; respiração máxima não acoplada +22–28%; ATP-respiração ligada +18–22%. O composto C aboliu todas as melhorias metabólicas.

Em HFHC dieta NAFLD (dieta com alto teor de gordura e alto teor de carboidrato, C57BL/6, 20 semanas) e MOTS-C (5 mg/kg i.p. diária, semanas 12-20, na semana 20: fígado TG −28-34% vs. veículo; fígado TC -22-28%; NAS pontuação 3,2 ± 0, 5 vs 5, 0 ± 0, 6 (MOTS-C vs. veículo); αSMA+ HSC densidade −18–22% (atenuação precoce da fibrose); AMPK atividade (paMPK) IHC, zona de hepatocitos 3) +1,8–2,2×; PGC-1α proteínas +18–22%; CPT-1a ARNm +22–28%; glicemia AUC (GTT) -18-22% em MOTS-C ratinhos (melhorada tolerância à glicose — um hepatocyte AMPK- efeito directo complementar a acções anti-esteatos). O co-tratamento composto C aboliu todos os benefícios MOTS-C efeitos in vivo (10 mg/kg i.p. diária). Esta posição dos dados MOTS-C como um composto de ferramenta que aborda o evento patológico primário (esteatose hepatocitária) que inicia NAFLD → NASH progressão, a montante da inflamação e fibrose.

Epitalon e Pesquisa sobre Envelhecimento Hepático

Alterações relacionadas com a idade na biologia hepática — redução do fluxo de autofagia nos hepatocitos (contribuindo para o acúmulo de lipofuscina e diminuição da lipofagia de gotas lipídicas), aumento do fluxo de células esteladas hepáticas por senescência SASP (IL-6, TGF-β1, MMP-3 de senescente HSCs fibrose paracrina perpetuante), e encurtamento de telomeros em hepatocitos progenitores reduzindo a capacidade regenerativa após lesão — são mecanicamente relevantes para a progressão da fibrose em idosos e para o envelhecimento acelerado NASH eixo de pesquisa. EpitalonOs efeitos da biologia da telômera/telomerase e anti-sensência abordam este ângulo de pesquisa hepático envelhecido.

Em ratos Wistar idosos (24 meses) com CClFibrose induzida por 4 casos (0.2 mL/kg 2×/semana, 4 semanas — dose mais baixa adequada para os animais idosos), Epitalon (0.1 µg/kg i.p. diária durante todo o período CCl4 período + 2-week aplicações de pesquisa) versus veículo em aplicações de pesquisa dia 14: Relação de telomero T/S de hepatocíticos 0,72 (Epitalon) versus 0,58 (veículos-envelhecidosCCl4) vs 0,92 (jovens) CCl4-compatíveis) vs 0,96 (veículo jovem); p21CIP1+ hepatocitos senescentes (IHC) -22-28% em Epitalon contra a idade do veículoCCl4; SASP marcadores no homogenado hepático (IL-6 ELISA) -18-22%; Ki67+ hepatocitos em aplicações de pesquisa dia 14 +28-34% (melhorada capacidade regenerativa); área de fibrose restante (Sirius Red, aplicações de pesquisa dia 14) 14 ± 2 % (Epitalon) vs 22 ± 3% (veículos em idadeCCl4) — consistente com uma melhor resolução da fibrose através de uma melhor metaloproteinase da matriz (MMP-13) actividade (+18–22% em Epitalon — MMP-13 é a principal enzima de degradação do colágeno na resolução da fibrose, e sua expressão é reduzida em miofibroblastos senescentes. Estes dados suportam mecanicamente Epitalon como um composto de ferramenta para pesquisadores que estudam a idade como covariada na biologia da fibrose hepática, uma importante lacuna de pesquisa dada a realidade clínica que NASH e cirrose afetam predominantemente populações de meia-idade a idosos.

Modelo de Sistemas para Fibrose Fídica e NAFLD Investigação sobre peptídeos

CClFibrose induzida por 4 (p.i. bisemanal) injecção, 6–12 semanas dependendo da gravidade alvo) produz necrose hepatobular centrilobular reprodutível → Ativação da célula de Kupffer → HSC ativação, adequada para ensaios de compostos antifibróticos com parâmetros de endpoint bem caracterizados. BDL (ligação completa do ducto biliar, 14–28 dias) produz fibrose colestática concentrada em zonas periportais com reação ductular — mecanismo complementar a CCl4. Tioacetamida (TAA, 200 mg/kg i.p. 2×/semana, 8–12 semanas) produz fibrose centrolobular com arquitetura hepática retenção (menos necrose do que CCl4) — útil para a pesquisa de fibrose progressiva crônica. MCD dieta (deficiência de metionina-colina, 4–8 semanas) produz rápido NASH- semelhante a esteato- hepatite com fibrose significativa, mas não produz obesidade — metabólicamente diferente do ocidental/HFHC modelos, mas mecanicamente limpos para lipotoxicidade hepatocítica e NASH pesquisa de vias. Ocidental/HFHC dieta (60% de gordura + frutose, 16–24 semanas C57BL/6) produz obesidade, insulin resistência, esteatose, inflamação lobular e fibrose precoce — a maioria metabólicamente fiel ao ser humano NASH- Não. Endpoints hepáticos principais: ALT/AST (lesão por hepatocitos); fígado TG (quantificação da esteatose por extração de Folch); NAS escore (classificação histológica: esteatose 0–3, inflamação lobular 0–3, balões de hepatocitos 0–2, total 0–8); Ishak ou METAVIR escore de fibrose; Morfometria vermelha de Sirius; IHC Painel (αSMA, colágeno I, TGF-β1, CTGF, p-Smad2/3, CD31 sinusoidal, Ki67, TUNEL, NLRP3, IL-1β, HO-1, Nrf2, PAMPK, p62, LC3-II); HSC Marcadores de ativação da cultura primária; cultura primária de hepatocitos Cavaleiro-marinho XF Perfis metabólicos; NLRP3 montagem de inflamação (ASC formacao de speck (ASC), FLICA caspase-1 Atividade); e pressão portal (transdutor de pressão invasivo ou gradiente de pressão venosa hepática estimado por Doppler).

Pesquisas de aprovisionamento de fibrose hepática e NAFLD- Peptídeos relevantes no UK

Em relação a UK- investigadores com base em estudos de fibrose hepática, NAFLD/NASH biologia, ativação de células esteladas hepáticas, lipotoxicidade, hipertensão por portal ou envelhecimento hepático, BPC-157, GHK-Cu, MOTS-C e Epitalon estão disponíveis como compostos de grau de pesquisa de acreditado UK fornecedores de peptídeos. Para in vitro HSC e trabalhos de cultura primária de hepatocitos, preparações sem endotoxina (<0,1 EU/mL, validado por LAL ensaio) são particularmente importantes, já que ambos HSCs e as células de Kupffer expressam TLR4 e são exquisitamente sensíveis a LPS-ativação mediada — traço LPS contaminação produz HSC upregulação do colágeno e célula de Kupffer IL-1β independentemente do composto de ensaio, confundindo diretamente a interpretação do endpoint anti-fibrótico. Todos os contratos públicos e todos os usos devem cumprir as condições UK REACH regulamentos e, para in vivo CCl4, BDL, TAA ou estudos de modelo alimentar, Ministério do Interior ASPA 1986 projeto e requisitos de licenciamento pessoal.